上海卡努生物科技有限公司
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人前列腺特异性抗原前体(Pro-PSA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下成蓝色,并在酸的作用下成终的。颜色的深浅和样品中的人前列腺特异性抗原前体(Pro-PSA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸
1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100L,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
每孔加入终止液50L,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
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- 编辑:王丽
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