什么是IVF动物实验？

　　 (一)IVF动物实验目的

　　通过动物实验，可熟练IVF基本的操作技能。用鼠胚进行培养，观察其发育情况，可从中了解培养液的质量(是否过期变质、渗透压、酸碱度改变以及毒性物质的污染)及培养箱的环境(水分、c02浓度、温度)是否适合胚胎的生长。

　　(二)促排卵药物

　　1．PMS或HMG-

　　2．HCG配成50Iu／m1

　　3．培养液①Earle’s液或DMEM液；②PBl冲洗液。

　　(三)操作方法

　　1．小鼠配子(精子、卵子)体外受精法举例如下：

　　(1)周一：5：00pm选雌鼠(25～30g)10只，腹腔内注射PMS(50IU／m1)0．2rnl(约10 IU)。

　　(2)周三：5：00pm再注射HCG(5011J／m1)0．2ml。

　　(3)周四：10：00am解剖雄、雌鼠，取出其输卵管、输精管。

　　 (4)在实体显微镜下取出精子、卵子后联合培养。

　　 (5)周五上午观察受精情况，将有受精、分裂为2细胞的胚胎吸出，放置另一个培养皿内继续培养2天，观察受精卵细胞分裂至前阶段。

　　细胞胚胎冲洗收集法举例如下：

　　 (1)周一：11：00am取雌鼠数只注射PMS 10 IU。

　　(2)周三：11：00am注射HCG 10 IU后雌鼠与雄鼠(1：1)合笼交配。

　　(3)周五：9：00am解剖雌鼠，取出输卵管，在实体显微镜下用一支细小的针头插入输卵管的末端，将受精卵冲出来，收集2细胞的胚胎进行培养观察。

　　操作要点：整个实验过程要快、保温，使pH的变化不大，做到无菌操作等。